吸取200μL待測液滴加到檢測卡(3.4.1.1)上的加樣孔中,開始計時。3~8 min內(nèi)觀察質(zhì)控線(C線)和檢測線(T線)的顯色情況,進行結(jié)果判定。
5.4 質(zhì)控試驗
每批樣品應同時進行空白試驗和加標質(zhì)控試驗。
5.4.1 空白試驗
稱取空白試樣,按照5.2和5.3步驟與樣品同法操作。
5.4.2 加標質(zhì)控試驗
準確稱取空白試樣2 g(精確至0.01g)置于15mL具塞離心管中,加入一定體積的巴比妥類標準中間液(3.3.2),使巴比妥類化學成分添加濃度為:巴比妥40 mg/kg(或苯巴比妥40 mg/kg,異戊巴比妥60 mg/kg,司可巴比妥鈉60 mg/kg)。按照5.2和5.3步驟與樣品同法操作。
6.結(jié)果判定
通過對比控制線(C線)和檢測線(T線)的顏色深淺進行結(jié)果判定,也可根據(jù)產(chǎn)品說明書進行。目視判定示意圖見圖1。
6.1 無效
控制線(C線)不顯色,表明不正確操作或檢測卡無效。
6.2 陰性結(jié)果
檢測線(T線)和控制線(C線)均顯色,表明樣品中巴比妥類化學成分低于方法檢測限,判定為陰性。
6.3 陽性結(jié)果
檢測線(T線)不顯色,控制線(C線)顯色,表明樣品中巴比妥類化學成分的含量高于方法檢測限,判定為陽性。
圖1 檢測結(jié)果判讀
6.4 質(zhì)控試驗要求
空白試驗測定結(jié)果應為陰性,加標質(zhì)控試驗測定結(jié)果應為陽性。
7 結(jié)論
當檢測結(jié)果為陽性時,應對結(jié)果進行確證。
8 性能指標
8.1 檢測限
巴比妥40mg/kg、苯巴比妥40mg/kg、異戊巴比妥60mg/kg、司可巴比妥鈉60mg/kg。
8.2 靈敏度
靈敏度應≥96%。
8.3 特異性
特異性應≥98%。
8.4 假陰性率
假陰性率應≤4%。
8.5 假陽性率
假陽性率應≤2%。
8.6 相對準確度
相對準確度應≥96%。
注:性能指標計算方法見附錄A
9其他
本方法所述試劑、試劑盒信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便,在使用本方法時不做限定,分析步驟和結(jié)果判定可以根據(jù)廠家試劑盒的說明書進行。方法使用者在使用替代試劑、試劑盒或操作步驟前,須對其進行考察,應滿足本方法規(guī)定的各項性能指標。
本方法參比標準為《國家食品藥品監(jiān)督管理總局藥品檢驗補充檢驗方法和檢驗項目批準件(批準件編號2009024)》和《保健食品中75種非法添加化學藥物的檢測BJS 201710》。